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实验六 饲料中总磷量的测定一、目的要求 通过实验，熟悉用钒黄显色光度法测定饲料（配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料和单一饲料）中总磷量的原理和方法。 二、原理 将试样中的有机物破坏，使其中的磷游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的（NH4）3PO4NH4VO3•16MOO3复合物，其黄色的深浅与磷的含量呈正比，再应用比色计在波长400 nm下进行比色测定，即可算出该试样中磷的含量。 三、仪器设备 （1）实验室用样品粉碎机或研钵。 （2）分样筛：孔径为0.45 mm（40目）。 （3）分析天平：感量为0.000 1 g。 （4）分光光度计：有10 mm比色池，可在400 nm下测定吸光度。 （5）高温炉：可控温度为550 ℃±20 ℃。 （6）瓷坩埚：50 mL。 （7）容量瓶：50 mL、100 mL、1 000 mL。 （8）刻度移液管：1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、5.0 mL、10 mL。 （9）凯氏烧瓶：125 mL、250 mL。 （10）可调温电炉：1 000 W。 四、试剂 本实验中所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯。实验室用水为蒸馏水或同等纯度的水。 （1）盐酸：化学纯，1∶1水溶液。 （2）硝酸：化学纯。 （3）高氯酸：分析纯，浓度为70%～72%。 （4）钒钼酸铵显色剂：称取偏钒酸铵1.25 g，加水200 mL，加热溶解，冷却后加硝酸250 mL，另称取钼酸铵25 g，加蒸馏水400 mL，加热溶解，在冷却的条件下，将两种溶液混合，用蒸馏水定容至1 000 mL，避光保存，若生成沉淀，则不能继续使用。 （5）标准磷溶液：将磷酸二氢钾在105 ℃下干燥1 h，在干燥器中冷却后称取0.219 5 g溶解于少量蒸馏水，定量转入1 000 mL容量瓶中，加硝酸3 mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，此溶液磷含量为50μg /mL。 五、试样制备 取有代表性的试样，粉碎至0.44 mm（40目），用四分法将试样缩分至200 g装入密封容器，防止试样成分变化或变质。 六、测定步骤 1. 试样处理 （1）干法（不适用含Ca（H2PO4）2的饲料）：称取试样2～5 g于瓷坩埚中，精确至0.000 2 g，在电炉上小心炭化至无烟后，再放入高温炉于550 ℃下灼烧3 h（或测定粗灰分后连续进行），然后取出冷却，在盛灰瓷坩埚中加入盐酸溶液10 mL和浓硝酸数滴，小心煮沸10 min，将此溶液转入100 mL容量瓶，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即试样分解液。 （2）湿法：称取试样2～5 g于凯氏烧瓶中，精确至0.000 2 g，加入硝酸30 mL，加热保持微沸至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入70%～72%高氯酸10 mL，继续加热至高氯酸冒白烟（不得蒸干），溶液基本无色，冷却，加水30 mL，加热煮沸，冷却后，用水转移至100 mL容量瓶中，并稀释至刻度线，摇匀，即试样分解液。 2. 标准曲线的绘制 准确吸取标准磷溶液0 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL、8.0 mL、16.0 mL于50 mL容量瓶中，各加钒钼酸铵显色剂10 mL，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，常温下静置10 min以上，以0 mL溶液为参比，用10 mm比色池，在400 nm波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度。以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 3. 试样的测定 准确移取试样分解液1～10 mL（磷含量为50～750 μg）于50 mL容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10 mL，定容至刻度线，摇匀，常温下静置10 min以上。以空白试剂溶液为参比，按标准曲线的绘制步骤显色和比色，测得试样分解液的吸光度，用标准曲线查得试样分解液的磷含量。 七、结果计算与表述 试样中总磷的含量按下式计算： 式中：P——试样中总磷的含量，%； m——试样的质量，g； m1——由标准曲线查得试样分解液总磷含量，μg； V——试样分解液总体积，mL。 V1——测量时移取的试样体积（mL）。 106——换算系数 所得到的结果应精确到0.01%。 八、允许误差每个试样称取两个平行样品进行测定，以其算术平均值为测定结果。总磷量低于0.5%，相对误差不超过10%；总磷量大于或等于0.5%，相对误差不超过3%。
国家开放大学《 动物营养与饲料》实验实习2（需网上提交,需形式为：实验报告电子版、实验报告照片、实验操作视频3选1）（2022-2023春季）相关练习题：
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